Оценка тяжести отсроченных изменений в состоянии нервно-мышечной системы при коррекции местной холодовой травмы III-IV степени препаратом плазмиды pCMV-VEGF165 в эксперименте

Аннотация

Введение: Спектр клинических проявлений отморожений довольно широк: начиная от травм, которые полностью заживают без каких-либо последствий, до травм, которые приводят к серьезной инвалидизации и ампутации конечностей. Однако даже без значительной потери тканей пациенты могут страдать от долгосрочных последствий после перенесенного отморожения. У 67% пациентов регистрируются долгосрочные осложнения от отморожения, наиболее частыми из них являются невропатия, хроническая боль и функциональные нарушения. Профилактика и лечение долгосрочных осложнений холодовой травмы является важной и сложной задачей.

Исход отморожения зависит от степени микрососудистого повреждения в данной ткани. Использование VEGF (фактора роста эндотелия сосудов) в качестве терапевтического средства при контактной холодовой травме имеет перспективы благодаря его способности стимулировать ангиогенез и улучшать трофику тканей, что может быть критически важно для восстановления поврежденных участков после отморожений.

Цель исследования: изучение эффективности применения генетической конструкции - плазмиды pCMV-VEGF165 при коррекции отсроченных осложнений холодовой травмы у крыс.

Материалы и методы: У 12 половозрелых самок крыс дикого типа массой 275±25 г в соответствии с международными правилами гуманного обращения с лабораторными животными под золетил-ксилазаловым наркозом была смоделирована местная холодовая травма III-IV степени путем контакта охлажденного в жидком азоте (-196°C) неодимового магнита с тыльной поверхностью дистального отдела задней левой конечности в течение 1 минуты. Исследуемый препарат плазмиды pCMV VEGF165 вводился местно на 2 и 7 сутки после моделирования отморожения крысам в края раны в дозе 60 мкг. Крысы контрольной группы получали инъекцию плацебо (вода для инъекций) аналогичным способом. Анализ отсроченных осложнений холодовой травмы был проведен путём оценки состояния нервно-мышечной системы посредством электромиографии на 28 и 60 сутки после моделирования патологии.

Результаты и обсуждение: В группе контроля на 28 сутки эксперимента регистрировалось статистически значимое снижение амплитуда отрицательной фазы М-ответа в 1,86 раза (p=0,004), также статистически достоверно отличавшееся от показателей группы pCMV-VEGF165 (p=0,013). Также выявлено статистически достоверное снижение амплитуды M-ответа в 1,75 (p=0,001) раза. Эти данные свидетельствуют об аксональном повреждении.

Отмечалось статистически достоверное увеличение латентного периода в среднем на 10% от показателей группы интактных животных (p=0,004). Удлинение латентного периода в совокупности с регистрируемыми у ряда животных полифазными ответами и сателлитными потенциалами в группе контроля на 28 сутки эксперимента может косвенно свидетельствовать об имеющейся миелинопатии.

Выраженные изменения отмечались при анализе показателя декремента отрицательной фазы М-ответа: данный показатель статистически достоверно возрастал в группе контроля как на 28, так и на 60 сутки в среднем в 2,2 раза. Рост декремента свидетельствует о развитии нарушения нервно-мышечного проведения в зоне холодовой травмы, что может быть связано со структурными или функциональными изменениями синапса и/или рецепторного аппарата вследствие их повреждения ишемическим, воспалительным или травматическим процессами.

В свою очередь, в группе интактных животных и группе pCMV-VEGF165 показатель амплитуды отрицательной фазы М-ответа был сопоставим, и достигал значений 0,39 [0,35; 0,47] мВ и 0,34±0,08 мВ соответственно (p>0,05). При анализе амплитуды M-ответа выявлено статистически достоверное ее снижение на 28 сутки эксперимента в группе pCMV-VEGF165 в 1,27 раза (p=0,047). Длительность латентного периода в группе pCMV-VEGF165 на 28 сутки также несколько увеличивалась, однако, статистически достоверно от показателей интактных животных не отличалась. Показатель декремента отрицательной фазы М-ответа в группе pCMV-VEGF165 на 28 и 60 сутки не отличался статистически достоверно от группы интактных животных. Отсутствие статистически достоверной разницы по показателю амплитуды отрицательной фазы М-ответа, латентности, декремента в группе pCMV-VEGF165 свидетельствует о способности указанного препарата предупреждать и уменьшать тяжесть повреждения нервных волокон в зоне холодовой травмы.

Заключение: Таким образом, препарат pCMV-VEGF165 благоприятно влияет на развитие отсроченных изменений в состоянии нервно-мышечной системы, что, вероятно, связано с уменьшением степени повреждения тканей и более быстрой их регенерацией вследствие восстановления достаточного уровня кровотока.

Графическая аннотация