Изучение системной экспозиции 4-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)-бензолсульфонамида в крови на крысах
DOI:
https://doi.org/10.18413/rrpharmacology.11.529Аннотация
Актуальность: 4-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)-бензолсульфонамид (ODASA) - новый противоглаукомный препарат. Сходные c ним по структуре соединения способны накапливаться в эритроцитах. Поэтому необходимо оценить фармакокинетические параметры ODASA и его метаболитов в цельной крови лабораторных животных
Цель: Расчет фармакокинетических параметров ODАSA и его метаболитов в цельной крови крыс после закапывания в глаза и внутрибрюшинного введения 1% глазной суспензии препарата
Материалы и методы: Группе из 6 крыс линии Wistar закапывали в каждый глаз 1% глазную суспензию ODASA в объеме 20 мкл. Препарат был введен путём внутрибрюшинной инъекции (IP) в такой же дозе 0,16 мг/кг другой группе из 6 крыс линии Wistar. Кровь отбирали в пробирки c K3ЭДТА. Отбор проб проводили перед введением и в 16 точках в течение 288 часов после введения. ВЭЖХ-МС/MС использовали для количественного определения ODASA, его метаболитов 4-[5-(гидроксиметил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил]-бензолсульфонамида (M1) и N-гидрокси-4-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)-бензолсульфонамида (M2). Для подготовки образцов применяли осаждение белков и форменных элементов метанолом с подкислением 1% водным раствором муравьиной кислоты.
Результаты: Валидация ВЭЖХ-МС/MC-метода проводилась в диапазоне 20-20000 нг/мл для ODASA, 10-10000 нг/мл для M1, 1-1000 нг/мл для M2. Наблюдался высокий уровень концентрации ODASA и M1: максимальная концентрация в крови (Cmax) ODASA после глазной инстилляции составила 10326± 532 нг/мл, Cmax M1 - 3722± 505 нг/мл. Величина Cmax М2 было ниже – 49.9± 9.4 нг/мл (M±SEM). Период полувыведения исследуемых соединений был более 69 часов. Наибольшее сродство к эритроцитам имеет М1. Значение площади под кривой «концентрация время» (AUC0-t) у М1 в крови более чем в 150 раз превышает AUC0-t M1 в плазме. Соотношение AUC0-t (кровь)/ AUC0-t (плазма) для ODASA после глазной интилляции составляет 56.25± 10.23, для M2 - 76.98± 19.88 (M±SEM).
Вывод: ВЭЖХ-МС/МС-метод был валидирован и применен для анализа образцов крыс. Препарат и его метаболиты обладают высокой концентрацией в крови по сравнению с плазмой и длительным периодом полувыведения. Это доказывает их накопление в эритроцитах
Графическая аннотация

Ключевые слова:
HPLC-MS/MS, whole blood, validation, pharmacokinetics, bioavailability, rats, carbonic anhydrase II inhibitor, N-hydroxysulfonamideБиблиографические ссылки
Begou O, Drabert K, Theodoridis G, Tsikas D (2020) GC-NICI-MS analysis of acetazolamide and other sulfonamide (R-SO2-NH2) drugs as pentafluorobenzyl derivatives [R-SO2-N(PFB)2] and quantification of pharmacological acetazolamide in human urine. Journal of Pharmaceutical Analysis 10(1): 49–59. https://doi.org/10.1016/j.jpha.2019.11.006 [PubMed] [PMC]
Busardo FP, Lo Faro AF, Sirignano A, Giorgetti R, Carlier J (2022) In silico, in vitro, and in vivo human metabolism of acetazolamide, a carbonic anhydrase inhibitor and common “diuretic and masking agent” in doping. Archives of Toxicology 96(7): 1989–2001. https://doi.org/10.1007/s00204-022-03289-z [PubMed] [PMC]
Dhandar AG, Chaudhari SR, Ganorkar SB, Patil AS, Surana SJ (2022) Mini-review on bioanalytical estimation of brinzolamide. Current Pharmaceutical Analysis 18(3): 265–272. https://doi.org/10.2174/1573412917666210812103414
ICH guideline M10 on bioanalytical method validation and study sample analysis (2022) https://www.ema.europa.eu/en/documents/scientific-guideline/ich-guideline-m10-bioanalytical-method-validation-step-5_en.pdf.
Khokhlov AL, Shetnev AA, Korsakov MK, Fedorov VN, Tyushina AN, Volkhin NN, Vdovichenko VP (2023) Pharmacological properties of sulfonamide derivatives — new inhibitors of carbonic anhydrase. Bulletin of Experimental Biology and Medicine 175 (2): 166–170. https://doi.org/10.47056/0365-9615-2023-175-2-166-170
Khokhlov AL, Yaichkov II, Shetnev AА, Korsakov MK, Volkhin NN, Petukhov SS, Tyushina AN, Lasaryanz OE (2024) The evaluation of pharmacokinetic parameters of 4-(5-methyl-1,3,4-oxadiazole-2-yl)-benzenesulfonamide and its metabolites in rat plasma. Research Results in Pharmacology 10(4): 67–76. https://doi.org/10.18413/rrpharmacology.10.523
Kurysheva NI (2020) Carbonic anhydrase inhibitors in the treatment of glaucoma. Review. Part II. Ophthalmology in Russia [Oftal'mologiya] 17(4): 676–682. https://doi.org/10.18008/1816-5095-2020-4-676-682 [in Russian]
Lo Faro AF, Tini A, Gottardi M, Pirani F, Sirignano A, Giorgetti R, Busardò FP (2021) Development and validation of a fast ultra-high-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method for determining carbonic anhydrase inhibitors and their metabolites in urine and hair. Drug Testing and Analysis 13(8): 1552–1560. https://doi.org/10.1002/dta.3055 [PubMed] [PMC]
Mironov AN (ed.) (2012) Guidelines for conducting preclinical studies of medicines. Volume 1. Polygraph Plus, Moscow, 944 pp.
Naageshwaran V, Ranta V-P, GumG, Bhoopathy S, Urtti A, Del Amo EM (2021) Comprehensive ocular and systemic pharmacokinetics of brinzolamide in rabbits after intracameral. Topical, and Intravenous Administration. Journal of Pharmaceutical Sciences 110(1): 529–535. https://doi.org/10.1016/j.xphs.2020.09.051 [PubMed]
On Approval of the Rules for Conducting Bioequivalence Studies on Medicines in the Eurasian Economic Union. Decision of the Council of the Eurasian Economic Commission № 85 of November 3, 2016 № 85 (2016) http://docs.cntd.ru/document/456026107(access date: 16.10.2024).
Yaichkov II, Khokhlov AL, Korsakov MK, Shetnev AA, Volkhin NN, Petukhov SS (2024) Pharmacokinetics study of a new isoxazole derivative in rats using HPLC-MS/MS for blood sample analysis. Regulatory Research and Medicine Evaluation 14(3): 304–316. https://doi.org/10.30895/1991-2919-2024-14-3-304-316
Загрузки
Опубликован
Как цитировать
Выпуск
Раздел
Лицензия
Copyright (c) 2025 Khokhlov AL, Yaichkov II, Shetnev AA, Korsakov MK, Volkhin NN, Petukhov SS, Tyushina AN, Lasaryanz OE

Это произведение доступно по лицензии Creative Commons «Attribution» («Атрибуция») 4.0 Всемирная.